产品名称:苏木精-伊红染色(HE)

详细信息

HE染色,即是苏木精-伊红染色法,是形态学最常用的染色方法,在质量较佳的HE染色切片上,各种组织或细胞的一般形态结特点都可以观察到。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
 

 
[操作流程]
1.将石蜡切片置于烘箱中60℃烤1~2h;
2.石蜡切片常规二甲苯,乙醇脱蜡至水,
3.苏木素染10分钟,
4.流水冲洗,去余色,
5.0.7%盐酸乙醇分化数秒钟,
6.流水冲洗,切片变蓝约15分钟,
7.95%乙醇30秒钟,
8.酒精性伊红染30秒,
9.I 95%乙醇30秒钟,
10.II 95%乙醇30秒钟,
11.I 100%乙醇30秒钟,
12.II100%乙醇30秒钟,
13.石碳酸二甲苯30秒钟,(1: 4石碳酸1-二甲苯4)
14.I二甲苯30秒钟,
15.II二甲苯30秒钟,
16.中性树胶封片。
 
[实验结果]:
镜下观察细胞核呈蓝色;细胞浆一般呈红色;胶原纤维呈不同程度的红色,红细胞呈亮红色;粘蛋白呈浅蓝色;钙化组织呈深蓝色等。
 
[实验中可能出现的问题及解决方案]:
1.细胞核染色苍白,暗淡
原因:此类问题可能有3个影响因素,切片在苏木精染色液停留时间太短;苏木精染色液过度氧化,失去染色能力,不能再继续使用;分化步骤处理时间过长。
对策:切片重新染色。适当延长苏木素染色的时间;更换苏木素染液;缩短分化时间。可以通过镜下观察来摸索染色和分化时间。
2.细胞核过染,即细胞核的蓝色太深,与周围细胞核连成一片,轮廓不清晰
原因:此类问题可能有3个影响因素,即切片在苏木精染色液停留过长、切片太厚、分化步骤时间太短。
对策:对切片进行脱色、漂白、重新染色,结合镜下观察对染色和分化时间做些适当的调整。如果确定是由于切片太厚导致的细胞核过染,则需要重新切片。
3. 伊红着色淡
原因:可能是伊红溶液旧,失去了染色能力;或经伊红染色后在乙醇脱水时间过长。
对策:对切片进行脱色、漂白、重新染色,结合镜下观察对染色和分化时间做些适当的调整。如果确定是由于切片太厚导致的细胞核过染,则需要重新切片。

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